Как сдать анализы ПЦР на 17 инфекций

Приветствую всех зашедших!

Так сложилось, что период моего трудоустройства пришёлся на пандемию и карантин, поглотившие целый мир.

Выпускную квалификационную работу я сдавала в режиме «онлайн», сидя дома за ноутбуком и защищая свой диплом перед веб-камерой.

Для любопытствующих могу сказать, что такой формат мне, в принципе, понравился, потому что можно было «отстреляться», отключить камеру и микрофон и пойти перекусить, пока другие товарищи проходили ту же процедуру.

Однако, в отличие от учебы, работать из дома не для каждой профессии возможно, да и при трудоустройстве необходимо подписывать трудовой договор, проходить инструктаж по ТБ и предоставлять персональные данные, что также не все компании готовы делать дистанционно.

И вот, получив ответ, что меня готовы взять в штат, и список документов, которые необходимо привезти в отдел кадров, я увидела в качестве одного из пунктов анализ на COVID-19. Разумеется, чтобы выйти на работу, необходим «отрицательный» результат.

Анализ я решила сдавать в лабораторной службе «Хеликс». Деньги, потраченные на анализ, мне обещала вернуть компания.

В Хеликсе можно сделать анализ как на сам COVID-19, так и на антитела. В первом случае, вы сдаёте мазки из ротоглотки и носоглотки, а во втором, насколько я поняла, кровь из вены. Мне, по требованию работодателя, нужно было сдать просто мазки и получить справку.

Записаться на анализ по выявлению коронавирусной инфекции в лаборатории Хеликс можно на их портале. После того, как вы оставите заявку, на оставленный номер телефона придёт СМС-сообщение, что вы записаны по такому-то адресу на такое-то время.

Как сдать анализы ПЦР на 17 инфекций

форма заявки на анализ

Вообще, несмотря на то, что Хеликс просит предварительно записаться на анализ, некоторые люди приходят и стоят в порядке живой очереди (если записано мало людей, то можно вполне попасть на сдачу мазка).

Приходить нужно в маске и перчатках.

В Хеликсе сдача анализов на коронавирусную инфекцию происходит в определённый промежуток времени, во время которого лабораторию закрывают от свободного посещения (очередь формируется на улице у входа в лабораторию, в помещение пускают по два-три человека).

Обращаю Ваше внимание на то, что тест не является анонимным (в отличие от теста на ВИЧ), и необходимо взять с собой паспорт.

Поскольку результат мне нужно было получить в кратчайшие сроки, я выбрала экспресс-тест (результаты на следующий день, в отличие от обычного теста). Стоимость такого анализа составляет 2600 рублей. Кроме того, к результату экспресс-теста можно получить справку на 16 языках, которая подойдёт для предъявления в аэропортах разных стран.

Как сдать анализы ПЦР на 17 инфекций

чек

Работник, бравший у меня анализ с помощью двух зондов (одним забирают биоматериал из ротоглотки, другим — из носоглотки), был полностью одет в хим. защиту, с респиратором и защитным экраном. Зонды вставляли достаточно глубоко, было неприятно, подступал рвотный рефлекс.

На следующий день на почту пришло уведомление, что результат готов и что я могу загрузить справку на сайте. Результат оказался отрицательным. Вот так выглядит справка:

Как сдать анализы ПЦР на 17 инфекций

моя справка

А вот так выглядит справка на английском языке: Как сдать анализы ПЦР на 17 инфекций

справка

В отделе кадров внимательно посмотрели на справку, а затем дали заявление на возвращение средств за анализ. В организации, куда я устраиваюсь, возвращают до 2500 рублей, т.е. полностью компания не возвращает потраченные средства. Я не сильно расстраиваюсь, т.к.

100 рублей для меня не являются особо большими деньгами, к тому же, у меня была возможность сдать обычный тест, который, естественно, дешевле, но я эту возможность прозевала, поэтому ответственность лежит на мне.

  • Для возмещения средств дали заявление и просили приложить договор об оказании услуги в лаборатории:

Как сдать анализы ПЦР на 17 инфекций

заявление

Как сдать анализы ПЦР на 17 инфекций

заявление

Надеюсь, мой отзыв был интересен и, возможно, вы узнали для себя что-то новое. Желаю всем здоровья в такое непростое время!

  1. Золотой шампунь для блеска волос
  2. Эффективный шампунь против перхоти
  3. Примерка одежды из магазина ЗАРИНА
  4. Пилинг для жирной кожи головы
  5. Ампулы для волос КЕРАСТАЗ

Все о ПЦР-тесте на коронавирус: срочный экспресс тест на ковид, где сделать, как сдать?

При подозрении на заражение новой коронавирусной инфекцией проводятся молекулярные и серологические исследования. Методика полимеразной цепной реакции – ПЦР – относится к молекулярным анализам и применяется для выявления вирусной РНК на любой стадии заболевания.

Как сдать анализы ПЦР на 17 инфекций

Пцр – это кровь или мазок?

ПЦР-тест на коронавирус – это основной и самый точный метод диагностики, который покажет наличие/отсутствие инфекции с вероятностью 99-100%. Причем достоверность результатов не зависит от формы болезни, нередко протекающей бессимптомно. Для анализа берут мазок из носа и зева.

К серологическим относятся исследования крови на антитела, но последние начинают вырабатываться не раньше чем на 5-й день с момента инфицирования. Поэтому в первые дни после заражения делать серологические тесты нецелесообразно.

Обследование на Covid-19 можно пройти бесплатно, по полису ОМС, но только по направлению врача. Платные анализы проводят в коммерческих клиниках – Медси, Хеликсе, Инвитро, Гемотесте. Там потребуют только паспорт и деньги.

При наличии явных признаков простуды – повышенной температуры, кашля, насморка – идти в лабораторию нет смысла, поскольку у таких пациентов брать анализ не будут. Альтернатива – вызов специалиста на дом.

Как проводится

Коронавирусная инфекция Sars-CoV-2 определяется посредством методики полимеразной цепной реакции, которая позволяет достичь значительного увеличения небольших концентраций отрезков вирусного ДНК во взятом образце. В данном случае биологическим материалом служит назальная слизь и отделяемое ротоглотки.

Чтобы проба была взята правильно, необходимы специальные контейнеры с закручивающейся крышкой и тупферы (от нем. Tupfer – тампон) – стерильные зонды из марли, ваты или другого пористого материала. Проще говоря, ватные палочки. Если в качестве биоматериала выступает слюна или мокрота, то пациенту выдается только стерильная пробирка.

Техника забора

Для получения максимально достоверных результатов тупфер вводится глубоко в носовые ходы (примерно на 2 см) особым движением, чтобы избежать травмирования слизистой, а также исключить рвотный рефлекс, приступ кашля или чихание.

Медицинский работник при контакте с потенциально зараженным пациентом одет в защитный комбинезон, перчатки, на голове – специальный экран или очки, респиратор.

В целях снижения распространения инфекции в некоторых лабораториях недавно ввели новую бесконтактную методику забора проб. Человеку дают контейнер с ватным зондом и объясняют, как взять мазок самому.

Ничего сложного здесь нет – тупфером проводят по внутренней поверхности щек максимально глубоко, ближе к миндалинам, а также внутри носовых ходов. Зонд прижимают к телу как можно плотнее, но при этом стараются не причинять себе боли и сильного дискомфорта.

Оба взятых мазка помещают в один контейнер, чтобы концентрация вируса, если он есть, была наибольшей.

При выборе бесконтактного способа возможно прибытие курьера на дом, с предоставлением клиенту подробной инструкции по взятию мазка. Это значит, что человек самостоятельно берет у себя образец, подписывает контейнер, запечатывает его в конверт и передает обратно курьеру.

Ввиду вероятности некорректного забора проб тестирование проводят как минимум 2 раза. Причем ошибки возможны не только при «самосдаче», но и в случае взятия мазка квалифицированным специалистом.

Берет ли мазки скорая помощь

В обязанности бригад «неотложки» не входит забор образцов на коронавирус, как нет и специального оборудования в каретах скорой помощи. Их задача – как можно скорее доставить больного в стационар, если он находится в критическом состоянии.

Поводом для вызова медиков является высокая температура >38.5° в сочетании с затрудненным дыханием и одышкой, выраженной слабостью. При подозрении на Ковид машина поедет в инфекционное отделение ближайшей больницы, где сделают компьютерную томографию или рентген, а также возьмут мазок на ПЦР-анализ.

Точность метода

Методика полимеразной цепной реакции обладает высокой чувствительностью и не пропустит вирус при его наличии в организме. Но есть одна деталь: иногда инфекция избирательно поражает легкие, и в носоглотке ее нет. Поэтому тест-система показывает ложноотрицательный результат.

Важно отметить также, что выявить Covid-19 с помощью ПЦР-теста можно в ограниченный период времени, с 3 по 9-ый день от начала болезни. Именно тогда часто проявляются первые симптомы – кашель, подъем температуры, затрудненное дыхание и ощущение скованности в грудной клетке.

ВАЖНО! При сдаче анализа в другие дни, кроме указанных, вероятность получения достоверного результата составляет около 40%.

Пока не понятно, почему тест-системы ПЦР выдают ложноотрицательные показатели. Предположительно, причина может быть одна – либо вирус изначально «поселился» в легких, либо спустился в нижние дыхательные пути в считанные дни.

Почему именно носоглотка

Назальный секрет «добыть» проще всего, поэтому производится забор именно этой биологической субстанции. Однако для исследования подходит практически любое отделяемое, и коронавирус можно обнаружить в промывных водах бронхов, фекалиях, моче, мокроте.

Наиболее информативным и часто используемым в стационарах методом является анализ промывных вод бронхов – в них инфекцию выявляют у 9 пациентов из 10. Мазок из носа позволяет поставить диагноз более чем в 60% случаев, еще менее чувствителен соскоб из глотки.

Что показывает ПЦР-тест

Лаборатории выдают только качественные результаты – положительные либо отрицательные, то есть обнаружена ли инфекция или нет. Из-за непредсказуемости Sars-CoV-2 ПЦР-тест обычно делают в комплексе с серологическими исследованиями и проверяют кровь на наличие антител.

Как сдать анализы ПЦР на 17 инфекций

Таким образом можно не только выявить возбудителя инфекции, но и оценить результаты с точки зрения заразности человека в данный момент. Критерии такой оценки приведены в следующей таблице.

Как сдать анализы ПЦР на 17 инфекций

Где сдать

Сдать мазок на коронавирус можно в государственных и частных клиниках. Анализы ПЦР делают в лабораториях Роспотребнадзора, научно-исследовательских институтах, а также в некоторых стационарах и поликлиниках.

Читайте также:  Как лечить воспаление маточных труб (сальпингит)

В тестировании населения принимают участие частные клиники – Диалайн, Инвитро, Медси, Гемотест, центр молекулярной диагностики CMD.

Срочный анализ за 1 день

Готовность анализа в 24 часа сегодня предлагает только центр молекулярной диагностики CMD. Здесь можно сдать экспресс-тест и получить результат уже на следующий день. Тест-система, которая применяется для исследования, является разработкой сотрудников Центрального НИИ Эпидемиологии.

Кроме того, недавно открылся новый пункт тестирования на коронавирусную инфекцию, расположенный в московском аэропорту Внуково. Он работает специально для прибывающих пассажиров из-за рубежа.

Здесь тоже делают тесты ПЦР в срочном порядке, с выдачей результатов спустя сутки. Для прохождения исследования необходимо зарегистрироваться на сайте arhimedlab.com и сразу внести оплату.

После регистрации на сайте онлайн или через QR-код нужно заполнить анкету, оплатить услугу и пройти в лабораторию, которая находится в зоне выдачи багажа. Исследования проводятся специалистами ООО «Клиника новых медицинских технологий АрхиМед».

Провериться на Sars-CoV-2 можно также в терминале В, пройдя через терминал D и таможенный контроль. Затем двигаться в сторону перехода между терминалами D и B, потом – прямо, до конца, где расположен медпункт.

В других коммерческих клиниках, включая Инвитро, анализы на коронавирус срочно не делают, и ждать придется не меньше 2-х дней. Кроме того, в офисах Инвитро ПЦР-тесты выполняются не везде, во многих крупных городах данные лаборатории ограничиваются проведением только серологических анализов на антитела.

Что делать, если результат ПЦР-теста положительный

Итоги тестирования человек узнает из 3-х возможных источников – на сайте клиники, из СМС-сообщения или электронного письма. Плюс ему обязательно позвонит специалист из лаборатории для уточнения дальнейших действий.

Есть два варианта – лечиться дома или в стационаре. Второй способ выбирают при наличии выраженной симптоматики – сильного кашля, высокой температуры, утраты обоняния и др.

Как сдать анализы ПЦР на 17 инфекций

Стоит отметить, что решение принимает не сам пациент, а медработники. Сведения о положительном результате тестирования незамедлительно передаются в Роспотребнадзор, после чего бригада медиков выезжает на дом к больному, где решается вопрос о его местопребывании.

Если состояние позволяет, и признаков инфекции нет, или они выражены слабо, рекомендации будут следующими:

  • Лабораторное исследованиеСколько стоит тест-система на коронавирус
  • самоизолироваться на 2 недели. Если нужен больничный лист, следует позвонить по единому телефону 8-800-2000-112, чтобы его привезли домой;
  • мерить температуру два раза в день;
  • проветривать комнату несколько раз в сутки;
  • при общении с людьми, живущими в одной квартире, носить маску;
  • контакты с друзьями и коллегами поддерживать только по телефону и интернету;
  • лучше не использовать вентиляторы, сплит-системы или очистители воздуха;
  • каждый день менять белье, включая постельное.

Первичный положительный анализ на Ковид является поводом для обследования всех членов семьи, которые находились в контакте с заболевшим. Они не обязаны соблюдать самоизоляцию, но при ухудшении самочувствия должны сообщить об этом в соответствующее медучреждение.

Советы, как подготовиться к сдаче и вопросы

Совет №1

Как минимум за час до забора биоматериала не стоит есть, пить, чистить зубы, полоскать рот, жевать резинку.

Совет №2

За 2-3 часа до процедуры исключаются любые продукты, включая леденцы и карамельные конфеты.

Как сдать анализы ПЦР на 17 инфекций

Приведенные правила имеют скорее рекомендательный характер, и даже при их неукоснительном соблюдении нет гарантии получения 100% точного результата. Бывает и наоборот, что, нарушив все правила, человеку выдаются абсолютно достоверные показатели.

Стоит также отметить, что на сайте Американской ассоциации клинической химии АСС нет прямых указаний на необходимость какой-либо подготовки к сдаче ПЦР-теста.

Правила сдачи мазка на ПЦР отличаются у разных клиник, но разница незначительная. В некоторых лабораториях пациентов просят воздержаться от употребления алкогольных напитков за день до анализа.

Как быть при наличии симптомов, если пациентам с ОРВИ не делают анализы?

В этом случае обращаться следует только в поликлинику. Коммерческие лаборатории отказались от приема простуженных больных из-за желания снизить риск распространения инфекции. Если появились симптомы ОРЗ или гриппа, можно позвонить в поликлинику и вызвать врача на дом.

Бывают ли ложноположительные результаты ПЦР-тестов?

Бывают, но очень редко, не более чем в 1.2% случаев. Намного чаще люди получают на руки ложноотрицательные результаты (до 78% случаев, в зависимости от типа тест-системы). Наименее надежны быстрые, или экспресс-анализы на антитела, для которых сдается кровь.

Поэтому диагноз ставится по итогам комплексного обследования, причем ПЦР-тесты обычно делают как минимум дважды. Были случаи, когда подтвердить Ковид удавалось лишь с 5-го раза.

Какой должен быть пульс при коронавирусе? Высокий и низкий пульс и давление при ковиде

Источник apkhleb.ru

Анализ ПЦР на 12 инфекций

Как сдать анализы ПЦР на 17 инфекцийАнализ ПЦР на 12 инфекций – это метод исследования, который основывается на использовании полимеразной цепной реакции, что в свою очередь позволяет обследовать пациента на наличие инфекционных и наследственных заболеваний независимо от их стадии: острой или хронической. Такой анализ может демонстрировать положительный результат задолго до того момента, как начнут проявляться симптомы различных заболеваний.

Преимущества ПЦР-анализа

Процедура диагностики процессов инфекционного типа посредством применения ПЦР сегодня очень актуальна.

Среди ее преимуществ стоит отметить обнаружение инфекционных агентов без наличия характерных симптомов заболевания, готовность результатов уже через четыре часа после процедуры, максимальную чувствительность к инфекционным агентам (демонстрирует положительный результат даже при наличии одной патогенной клетки).

Ошибочные и ложные реакции практически исключены, а кроме того анализ позволяет выявить РНК или ДНК агента инфекционного типа.

На данный момент диагностическая методика проходит активные этапы усовершенствования, появляются новые разновидности ПЦР.

Основа ПЦР

Процедура диагностики проводится только в лабораторных условиях с применением специальных ферментов, которые способствуют увеличению структуры РНК и ДНК пациента в несколько раз.

Иными словами, число РНК и ДНК достигает уровня, по которому можно делать анализ визуально.

В период проведения обследования проводится процесс копирования участка ДНК или РНК, который с максимальной точностью подходит под определенные условия.

Каждая лаборатория, работающая с этим типом диагностики, обладает специальной базой данных, которая позволяет точно определить наличие того или иного инфекционного агента.

Количество лабораторий, которые предлагают подобного рода методику, с каждым днем увеличивается, что позволяет диагностировать каждого желающего. Метод ПЦР позволяет не только определить наличие возбудителя, но и максимально точно подсчитать его количественное соотношение.

Среди новшеств, которые предлагает диагностика, стоит отметить возможность определения отцовства, соединение определенных участков ДНК, введение мутаций и др.

Инфекции, которые можно выявить посредством ПЦР-анализа

Как сдать анализы ПЦР на 17 инфекцийПЦР-анализ активно используют гинекологи, онкологи, гастроэнтерологи, фтизиатры, пульмонологи и др. Анализ ПЦР позволяет выявить следующие процессы инфекционного типа:

  • инфекции хеликобактер пилори;
  • кандидозные инфекции;
  • ВПЧ и его онкогенные подвиды;
  • инфекции, которые передаются половым путем;
  • ВИЧ;
  • герпес первого и второго типа, гепатиты;
  • микобактерии туберкулеза;
  • вирус Эпштейн-Барра;
  • цитомегаловирус (ЦМВ);
  • вирус герпеса человека (ВГЧ) 6 типа.

И это лишь основная часть инфекций, которые можно определить посредством использования ПЦР-анализа.

Правила и алгоритм проведения забора материала для анализа

Для того, чтобы определить у пациента наличие инфекции, которая передается через половой контакт, берут на исследование мазок/соскоб из половых органов или урину. В случае, если исследование производится с целью определения инфекционных заболеваний, таких как гепатит, герпес, ВИЧ и т.д., используется венозная кровь пациента.

Для исследования на наличие мононуклеоза (вируса Эпштейн-Барра) используется мазок из ротовой полости. Иногда для анализа необходима спинномозговая жидкость – она позволяет определить причину появления определенных неврологических заболеваний.

Если же у новорожденного ребенка есть подозрение на наличие внутриутробного инфицирования, для исследования берут кусочек плаценты и пробу околоплодных вод.

Результаты проведения диагностики максимально достоверны, и ошибка практически исключена. Достоверность процедуры напрямую зависит от того, насколько правильно были взяты материалы для проведения анализа.

Среди самых важных рекомендаций перед сдачей материала на анализ стоит отметить то, что моча собирается в утреннее время в специальный стерильный контейнер, кровь сдают утром натощак.

Кроме того, за 24 часа до процедуры запрещается вступать в половой контакт, а перед сдачей мазка необходимо за два часа провести акт мочеиспускания.

Женщинам за двое суток до процедуры нужно отказаться от спринцевания и введения суппозиторий во влагалище.

Результаты анализа могут быть готовы как за четыре часа, так и за двое суток, все напрямую зависит от диагностируемого заболевания и качества взятого на анализ материала.

Расшифровка результатов

Результат может оказаться как отрицательным, так и положительным. Отрицательный ответ демонстрирует то, что во взятом на анализ образце не обнаружено патогенных клеток инфекционного типа.

Положительный анализ говорит о наличии в предоставленном для анализа образце инфекционных агентов.

При наличии позитивного результата анализа необходимо подобрать эффективное и качественное лечение максимально быстро.

Положительный результат без наличия симптоматики заболевания является показателем ранней стадии развития заболевания либо того, что пациент является носителем инфекции. В отношении к носителям медикаментозная терапия не применяется, но регулярно проводятся контрольные анализы для отслеживания динамики. Среди таких заболеваний – герпес и папилломавирусная инфекция.

Если пациент является носителем инфекционного заболевания – он подвергает опасности всех окружающих, следовательно, рекомендуется проводить терапию, которая будет блокировать распространение инфекции.

В результатах указываются также количественные характеристики патогенных клеток, основываясь на которых доктор определяет активность заболевания и подбирает максимально эффективный терапевтический курс. Среди самых важных характеристик анализа ПЦР на 12 инфекций стоит отметить: чувствительность, специфичность и точность.

Автор статьи:

Фурманова Елена Александровна

  • Специальность: врач педиатр, инфекционист, аллерголог-иммунолог.
  • Общий стаж: 7 лет.
  • Образование: 2010, СибГМУ, педиатрический, педиатрия.
  • Опыт работы инфекционистом более 3 лет.
Читайте также:  Что делать, если застужены придатки

Имеет патент по теме «Способ прогнозирования высокого риска формирования хронической патологии адено-тонзиллярной системы у часто болеющих детей». А также автор публикаций в журналах ВАК.

Анализ ПЦР — самая точная диагностика на инфекции

Полимеразная цепная реакция (ПЦР) – это современный инструмент диагностики разнообразных инфекций, отличающийся высокой точностью. Анализ ПЦР позволяет определять возбудителей инфекционных заболеваний, опираясь на их генетический материал (РНК или ДНК). Биологическим материалом для исследования может служить кровь, мазок из половых органов, слюна и прочее.

НАЖМИТЕ, ЧТОБЫ ЗАПИСАТЬСЯ

Метод ПЦР  был открыт в 1983. Его создатель Кэри Мюллис (США), за это открытие получил Нобелевскую премию в области химии. Уже за первые десять лет методика стала обязательным лабораторным исследованием во всем мире, получив признание ученых и врачей.

Медицинский центр Диана предлагает провести исследование по методике полимеразной цепной реакции в кратчайшие сроки и с высочайшим уровнем точности. Наша диагностическая база соответствует всем международным стандартам и требованиям.

Какие инфекции можно диагностировать методом ПЦР

На диагностику отправляют гинеколог, уролог или дерматолог. Анализ ПЦР дает возможность диагностировать большое число разнообразных инфекций. В эту группу попадают и скрытые, бессимптомные заболевания, находящиеся в инкубационном периоде:

С помощью метода ПЦР можно обнаружить:

  • гепатит C, B;
  • уреаплазмоз половых органов;
  • ИППП – уреаплазмоз, трихомониаз, гарднереллез,;
  • хламидиоз половых органов и дыхательных путей;
  • микоплазмоз половых органов и дыхательных путей;
  • бактериальный вагиноз;
  • кандидоз половых органов;
  • инфекционный мононуклеоз;
  • туберкулез;
  • сальмонеллез;
  • туберкулез (легочные и внелегочные формы);
  • листериоз, клещевые энцефалиты, болезнь Лайма;
  • цитомегаловирусную, папилломавирусную, герпесную  инфекцию;
  • детские заразные болезни, выявляемые при беременности и до зачатия — краснуху, паротит, дифтерию, корь;
  • ВИЧ.

При каждом из вышеперечисленных заболеваний, обнаруженным другим методом, желательно делать и ПЦР — исследование. Возбудители многих инфекций имеют несколько типов (штаммов), а более точная диагностика делает лечение эффективнее.

Поскольку разные типы возбудителей обладают своими способами передачи инфекции, точное определение возбудителя помогает уберечь от заражения окружающих.

Например, гепатитом А можно заразиться через общие предметы и посуду (болезнь грязных рук), а гепатитом С — только через кровь, медицинские инструменты и половые контакты. Это важно для тех, кто находится рядом с больным.

Суть метода полимеразной цепной реакции

Метод основан на выявлении возбудителя по участкам ДНК или РНК. ПЦР напоминает криминалистику, когда преступника находят по частичкам кожи или волосам, оставленным на месте преступления. Поскольку каждый живой организм имеет уникальную структуру ДНК или РНК.

Метод позволяет безошибочно идентифицировать микроорганизм, даже если он присутствует в исследуемом материале в минимальных количествах. ПРЦ подходит для выявления скрытого носительства, нетипичных, стертых и прочих форм заразных заболеваний. Диагностика отличается высокой точностью, поэтому практически не дает ошибок и ложных результатов.

Анализ часто назначается, как дополнительное обследование, чтобы выявить конкретный тип вируса или микроба.

Достоинства и недостатки метода ПЦР

Анализ ПЦР – результативный диагностический инструмент, позволяющий врачу не только правильно определить тип инфекционного возбудителя в организме больного, но также и количество микробов. Эта особенность позволяет методу ПЦР эффективно обнаруживать и хронические инфекции, к примеру, вирусный гепатит.

Преимущества методики заключаются в следующих особенностях:

  • Универсальность. Метод дает возможность определить все известные на сегодняшний день микроорганизмы, вне зависимости от вида исследуемого материала.
  • Специфичность. ПЦР позволяет определить ДНК вируса или бактерии со 100% точностью, что не дает ни один другой способ диагностики.
  • Чувствительность – даже один мельчайший «обломок» ДНК или РНК может быть обнаружен и идентифицирован, благодаря быстрой реакции образования копий.
  • Оперативность – поставить диагноз на основании полимеразной цепной реакции можно уже через несколько часов после забора биологического материала, что дает возможность своевременно приступить к лечению заболевания.
  • Возможность проведения количественного анализа. Эта особенность важна при выявлении болезней, вызванных условно-патогенной флорой (например, молочницы). Повышенное содержание грибков кандида  в организме вызывает заболевание, а нормальное количество до 10 3 — 104 КОЕ/тамп. – нет.

Недостатки ПЦР-диагностики – это необходимость в высокотехнологичном оборудовании и высококвалифицированных специалистах. Для анализа нужен специальный бокс-ламинар, где поддерживается необходимая температура и обеспечивается чистота эксперимента.

Как сдать анализ ПЦР правильно: подготовка 

Чтобы понять, как именно следует подготовиться к предстоящему анализу ПЦР, пациент должен обязательно уточнить у своего врача, какой именно биологический материал планируется взять. От этого непосредственно зависит подготовка.

  • Выделения из половых органов, мазок из шейки матки или мочеиспускательного канала, моча – посредством исследования данных вариантов материала методом ПЦР эффективно диагностируются инфекции половых органов.
  • Вирусный гепатит C, ВИЧ инфекция требуют взятие крови на анализ ПЦР.
  • С помощью мазка из зева можно подтвердить или опровергнуть факт наличия инфекционного мононуклеоза.

Мазок у женщин

Для диагностики половых инфекций методом ПЦР у женщин, как правило, берут . При беременности действуют стандартные правила подготовки к анализу ПЦР.

  • За пару дней до проведения ПЦР нужно отказаться от спринцеваний, средств интимной гигиены.
  • За неделю до анализа на инфекции стоит перестать применять любые виды лекарственных препаратов, разумеется, если они не входят в программу подготовки к анализу ПЦР, прописанную врачом.
  • За пару дней до обследования нужно начать воздерживаться от полового акта.
  • Подмывание в день анализа ПЦР не нужно, гигиена половых органов проводится накануне вечером, используется только теплая вода.
  • За пару часов до сдачи анализа мочиться нельзя.

Мазок у мужчин

Подготовиться к забору мазка из мочеиспускательного канала для проведения ПЦР несложно. Достаточно соблюдать изложенные ниже правила.

  • За 2 суток до ПЦР обследования нужно начать воздерживаться от сексуальных отношений.
  • Прием лекарств прекращается приблизительно за 7 дней до проведения анализа, если, конечно же, они не были специально назначены врачом.
  • Гигиена половых органов должна проводиться накануне вечером, в день анализа ПЦР это делать не стоит.
  • Рекомендуется не мочиться примерно 2-3 часа перед сдачей анализа.

Анализ крови

Если в процессе ПЦР анализа объектом изучения станет кровь пациента, правила подготовки к нему следующие.

  • Оптимальное время для сдачи крови – утро, анализ нужно обязательно сдавать натощак (минимум 8 часов отсутствия пищи). Воду можно пить свободно.
  • Отказ от алкоголя за сутки до ПЦР анализа, отказ от курения за час до него.
  • Если здоровье допускает такой вариант, от приема лекарственных средств рекомендуется на время отказаться.
  • Перед сдачей проб крови в обязательном порядке следует отдохнуть около 20 минут.
  • Накануне ПЦР исследования совершенно исключены эмоциональные и физические перегрузки, они могут сказаться на результатах анализа.

Как проводится тест ПЦР?

Для исследования берется любая среда, в которой может находиться возбудитель, но чаще всего используются:

  • Кровь сыворотка или плазма – для выявления множества возбудителей – вирусов гепатита B, C, D, G, герпеса, ВИЧ, цитомегаловируса;
  • Моча и сок простаты – при диагностике ЗППП;
  • Мокрота, плевральная жидкость, бронхоальвеолярный лаваж – для диагностики легочных и внелёгочных форм туберкулеза;
  • Спинномозговая жидкость – для диагностики инфекций нервной системы;
  • Околоплодная жидкость – для определения внутриутробных заражений;
  • Мазок из зева – для выявления возбудителей инфекционного мононуклеоза и дифтерии; соскобы и мазки со слизистых  для диагностики ЗППП; клетки слизистой желудка и желудочный сок — для выявления бактерии хеликобактер, вызывающей гастрит и язву.

При одном взятии материала можно обнаружить сразу нескольких возбудителей, попавших в организм. Такая универсальность избавляет пациента от дополнительных обследований и лишних трат.

Обнаружить и идентифицировать участки генетической информации удается при помощи специальных эталонных маркеров ДНК (праймеров) созданных для каждого известного возбудителя. Эталон позволяет найти «свой» фрагмент среди миллионов других.

Если это происходит, запускается реакция полимеразной цепи.

ПЦР—реакция делает огромное число копий выявленного участка генной информации (репликацию). Важно, что реплицируются только участки ДНК и РНК, необходимые для проведения анализа. Поэтому так важны чистота эксперимента и умение персонала обращаться с аппаратурой и образцами. Цепная реакция протекает очень быстро, уже через два часа участок ДНК увеличивается в миллионы раз, что позволяет обнаружить и точно идентифицировать инфекцию. Для работы с эталонами пробирки помещают в специальный прибор. При помощи программы задается алгоритм, несколько раз меняющий температуру среды и влияющий на протекание реакции. Результат ПЦР виден сразу после окончания исследования.

Как расшифровать ПЦР анализ

Проведение ПЦР исследования позволяет не просто установить тип инфекции, присутствующий в организме больного, но и оценить его с количественной точки зрения (количество микробов). Расшифровка результатов количественного анализа ПЦР играет важную роль в обнаружении и проверке эффективности лечения большого числа хронических заболеваний, скажем гепатита C.

Результатом анализа ПЦР могут стать положительный и отрицательный ответы.

  • Отрицательный результат. Следы инфекции не были выявлены в биологическом материале, который являлся объектом исследования в процессе анализа ПЦР. Как правило, на основании отрицательного результата можно полагать, что в организме действительно отсутствует инфекция.
  • Положительный результат. Такой результат анализа ПЦР свидетельствует о том, что следы инфекционного заболевания присутствуют в биологическом материале пациента. Положительный результат анализа ПЦР характеризуется большой степенью точности.

Иногда инфицирование выявляется на фоне полного здоровья и отсутствия признаков заболевания. Некоторые больные считают, что анализ сделан неправильно, но реальная ситуация другая. Если ПЦР показала, что возбудитель в организме есть, значит, он там действительно находится.

Просто инфекционные болезни никогда не начинаются сразу после заражения, имея инкубационный период различной продолжительности. Скрытый период может продолжаться очень долго, например, при СПИДе – несколько лет, пока какие-то механизмы не подтолкнут вирусы к размножению. Возбудитель определяется в организме носителей и тех, кто не долечился.

Читайте также:  Отек Квинке на мизопростол

Очень часто переходят в скрытую (латентную) форму различные ЗППП. В этом случае может понадобиться дополнительная лабораторная диагностика.

Точность расшифровки результатов ПЦР анализа

Метод ПЦР, позволяющий выявлять достаточно большое число инфекций, характеризуется повышенной точностью, чувствительностью и специфичностью. Эти характеристики говорят о том, что с помощью исследования ПЦР можно:

  • Максимально точно установить отсутствие или присутствие инфекционного возбудителя.
  • Максимально точно определить конкретную разновидность инфекционного возбудителя (специфичность).
  • Выявить инфекцию даже в том случае, когда она имеет скрытый характер. Речь идет о низком уровне присутствия в подвергаемом исследованию биологическом материале пациента ДНК микробов (чувствительность).

Преимущества метода ПЦР над иммуноферментным анализом и прочими иммунологическими инструментами выявления инфекции заключается в том, что он реже дает ошибочные результаты. То есть расшифровка анализа ПЦР значительно реже показывает отсутствие инфекционных микробов, если они есть в организме больного.

Кроме того, почти не бывает, чтобы расшифровка анализа выявляла наличие в организме несуществующей инфекции, то есть давала ложноположительные результаты.Разумеется, стопроцентно правильными результаты ПЦР назвать все же нельзя, поэтому необходимо обязательно дополнять это исследование другими методиками.

ПЦР: что это такое? Диагностика инфекционных заболеваний методом полимеразной цепной реакции

Информацию из данного раздела нельзя использовать для самодиагностики и самолечения. В случае боли или иного обострения заболевания диагностические исследования должен назначать только лечащий врач. Для постановки диагноза и правильного назначения лечения следует обращаться к Вашему лечащему врачу.

В конце статьи см. словарь Полимеразную цепную реакцию (ПЦР, PCR) изобрёл в 1983 году Кэри Мюллис (американский учёный). Впоследствии он получил за это изобретение Нобелевскую премию. В настоящее время ПЦР-диагностика является, одним из самых точных и чувствительных методов диагностики инфекционных заболеваний. Полимеразная цепная реакция (ПЦР) — экспериментальный метод молекулярной биологии, способ значительного увеличения малых концентраций определённых фрагментов нуклеиновой кислоты (ДНК) в биологическом материале (пробе). В основе метода ПЦР лежит многократное удвоение определённого участка ДНК при помощи ферментов в искусственных условиях (in vitro). В результате нарабатываются количества ДНК, достаточные для визуальной детекции. При этом происходит копирование только того участка, который удовлетворяет заданным условиям, и только в том случае, если он присутствует в исследуемом образце. Кроме простого увеличения числа копий ДНК (этот процесс называется амплификацией), ПЦР позволяет производить множество других манипуляций с генетическим материалом (введение мутаций, сращивание фрагментов ДНК), и широко используется в биологической и медицинской практике, например, для диагностики заболеваний (наследственных, инфекционных), для установления отцовства, для клонирования генов, введения мутаций, выделения новых генов.

Специфичность и применение

ПЦР — метод молекулярной диагностики, ставший для ряда инфекций «золотым стандартом», проверен временем и тщательно апробирован клинически. Метод ПЦР позволяет определить наличие возбудителя заболевания, даже если в пробе присутствует всего несколько молекул ДНК возбудителя.

ПЦР позволяет диагностировать наличие долго растущих возбудителей, не прибегая к трудоёмким микробиологическим методам, что особенно актуально в гинекологии и урологии при диагностике урогенитальных инфекций, передающихся половым путем (ИППП). Также, этим методом проводят диагностику вирусных инфекций, таких как гепатиты, ВИЧ и др. Чувствительность метода значительно превосходит таковую у иммунохомических и микробиологических методов, а принцип метода позволяет диагностировать наличие инфекций со значительной антигенной изменчивостью. Специфичность ПЦР при использовании технологии PCR даже для всех вирусных, хламидийных, микоплазменных, уреаплазменных и большинства других бактериальных инфекций достигает 100%. Метод ПЦР позволяет выявлять даже единичные клетки бактерий или вирусов. ПЦР-диагностика обнаруживает наличие возбудителей инфекционных заболеваний в тех случаях, когда другими методами (иммунологическими, бактериологическими, микроскопическими) это сделать невозможно. Особенно эффективен метод ПЦР для диагностики трудно культивируемых, некультивируемых и скрыто существующих форм микроорганизмов, с которыми часто приходится сталкиваться при латентных и хронических инфекциях, поскольку этот метод позволяет избежать сложностей, связанных с выращиванием таких микроорганизмов в лабораторных условиях. Применение ПЦР-диагностики также очень эффективно в отношении возбудителей с высокой антигенной изменчивостью и внутриклеточных паразитов. Методом ПЦР возможно выявление возбудителей не только в клиническом материале, полученном от больного, но и в материале, получаемом из объектов внешней среды (вода, почва и т. д.). В урологической и гинекологической практике — для выявления хламидиоза, уреаплазмоза, гонореи, герпеса, гарднереллёза, микоплазменной инфекции, ВПЧ — вирусов папилломы человека; в пульмонологии — для дифференциальной диагностики вирусных и бактериальных пневмоний, туберкулёза; в гастроэнтерологии — для выявления хеликобактериоза; в клинике инфекционных заболеваний — в качестве экспресс-метода диагностики сальмонеллёза, дифтерии, вирусных гепатитов В, С и G; в гематологии — для выявления цитомегаловирусной инфекции, онковирусов. Специфичность ПЦР основана на образовании комплементарных комплексов между матрицей и праймерами — короткими синтетическими олигонуклеотидами длиной 18 — 30 букв. Каждый из праймеров сопоставим (комплементарен) с одной из цепей двуцепочечной матрицы, обрамляя начало и конец амплифицируемого участка. После соединения (гибридизации) матрицы с праймером (отжиг), последний служит затравкой для ДНК-полимеразы при синтезе комплементарной цепи матрицы.

Проведение ПЦР

Для проведения ПЦР в простейшем случае требуются следующие компоненты:

  • ДНК-матрица, содержащая тот участок ДНК, который требуется амплифицировать;
  • два праймера, комплементарные концам требуемого фрагмента;
  • термостабильная ДНК-полимераза;
  • дезоксинуклеотидтрифосфаты (A, G, C, T);
  • ионы Mg2+, необходимые для работы полимеразы;
  • буферный раствор.

ПЦР проводят в амплификаторе — приборе, обеспечивающем периодическое охлаждение и нагревание пробирок, обычно с точностью не менее 0,1°C. Чтобы избежать испарения реакционной смеси, в пробирку добавляют высококипящее масло, например, вазелиновое. Добавление специфичеких ферментов может увеличить выход ПЦР-реакции. Ход реакции

Обычно при проведении ПЦР выполняется 20 — 35 циклов, каждый из которых состоит из трех стадий.

Двухцепочечную ДНК-матрицу нагревают до 94 — 96°C (или до 98°C, если используется особенно термостабильная полимераза) на 0,5 — 2 минуты, чтобы цепи ДНК разошлись.

Эта стадия называется денатурацией — разрушаются водородные связи между двумя цепями. Иногда перед первым циклом проводят предварительный прогрев реакционной смеси в течение 2 — 5 минут для полной денатурации матрицы и праймеров.

Когда цепи разошлись, температуру понижают, чтобы праймеры могли связаться с одноцепочечной матрицей. Эта стадия называется отжигом. Температура отжига зависит от праймеров и обычно выбирается на 4 — 5°С ниже их температуры плавления. Время стадии — 0,5 — 2 минут.

ДНК-полимераза реплицирует матричную цепь, используя праймер в качестве затравки. Это — стадия элонгации. Температура элонгации зависит от полимеразы. Часто используемые полимеразы наиболее активны при 72°C.

Время элонгации зависит как от типа ДНК-полимеразы, так и от длины амплифицируемого фрагмента. Обычно время элонгации принимают равным одной минуте на каждую тысячу пар оснований.

После окончания всех циклов часто проводят дополнительную стадию финальной элонгации, чтобы достроить все одноцепочечные фрагменты. Эта стадия длится 10 — 15 мин.

Подготовка материала к исследованию и транспорт его в лабораторию Для успешного проведения анализа важно правильно собрать материал у пациента и правильно провести его подготовку. Известно, что в лабораторной диагностике большинство ошибок (до 70%) совершается именно на этапе пробоподготовки. Для взятия крови в лаборатории ИНВИТРО  в настоящее время применяются вакуумные системы, которые с одной стороны минимально травмируют пациента, а с другой — позволяют произвести взятие материала таким образом, что он не контактирует ни с персоналом, ни с окружающей средой. Это позволяет избежать контаминации (загрязнения) материала и обеспечивает объективность анализа ПЦР.

Словарь

ДНК – дезоксирибонуклеиновая кислота — биологический полимер, один из двух типов нуклеиновых кислот, обеспечивающих хранение, передачу из поколения в поколение и реализацию генетической программы развития и функционирования живых организмов. Основная роль ДНК в клетках — долговременное хранение информации о структуре РНК и белков. РНК– рибонуклеиновая кислота — биологический полимер, близкий по своему химическому строению к ДНК. Молекула РНК построена из тех же мономерных звеньев — нуклеотидов, что и ДНК. В природе РНК, как правило, существует в виде одиночной цепочки. У некоторых вирусов РНК является носителем генетической информации. В клетке играет важную роль при передаче информации от ДНК к белку. РНК синтезируется на ДНК-матрице. Процесс этот называется транскрипцией. В ДНК имеются участки, где содержится информация, ответственная за синтез трех видов РНК, различающихся по выполняемым функциям: информационной или матричной РНК (мРНК), рибосомальной (рРНК) и транспортной (тРНК). Все три вида РНК тем или иным способом участвуют в синтезе белка. Однако информация по синтезу белка содержится только в мРНК. Нуклеоти́ды — основная повторяющаяся единица в молекулах нуклеиновых кислот, продукт химического соединения азотистого основания, пятиуглеродного сахара (пентозы) и одной или нескольких фосфатных групп. Нуклеотиды, представленные в нуклеиновых кислотах, содержат одну фосфатную группу. Они называются по содержащемуся в них азотистому основанию — адениновый (A), содержащий аденин, гуаниновый (G) — гуанин, цитозиновый (C) — цитозин, тиминовый (Т) — тимин, урациловый (U) — урацил. В состав ДНК входят 4 типа нуклеотидов — A, T, G, C, в состав РНК также 4 типа — A, U, G, C. Сахаром в составе всех нуклеотидов ДНК является дезоксирибоза, РНК — рибоза. При образовании нуклеиновых кислот нуклеотиды, связываясь, образуют сахаро-фосфатный остов молекулы, по одну сторону которого находятся основания. Праймер – котроткая ДНК, используемая для репликации матричной цепи. Каждый из праймеров комплементарен одной из цепей двуцепочечной матрицы, обрамляя начало и конец амплифицируемого участка.  Литература

  1. Глик Б., Пастернак Дж. Молекулярная биотехнология. Принципы и применение. Пер. с англ. — М.: Мир, 2002. — 589 с., илл. ISBN 5-03-003328-9

Оставьте комментарий

Ваш e-mail не будет опубликован. Обязательные поля помечены *